Die kulturgeschichtliche Sammlung ist ausgerichtet auf die Historie der Stadt Heilbronn und prägende Themen der Region – darunter die Neckarschifffahrt oder die hiesige Silberwarenindustrie. Fein gearbeitete Bestecke und eindrucksvolle Tafelaufsätze bezeugen die Kunstfertigkeit des Unternehmens Bruckmann & Söhne, das im 19. Jahrhundert weltbekannt war.

Großzügige Schenkungen von privaten Sammlern bereichern als Konvolute mit spezifischer thematischer Ausrichtung den Bestand – dem Metrologe Otto Spiegler beispielsweise verdanken die Städtischen Museen eine Sammlung historischer Waagen und Messgeräte, die in ihrer Vielfalt ihresgleichen sucht. Das Heilbronner Ehepaar Richard Becker und Marie Franck sammelte unter anderem hochwertige Porzellane der Manufakturen in Ludwigsburg und Meissen.

Eine Vielzahl volkskundlicher Objekte vor allem aus dem 19. und 20. Jahrhundert dokumentiert verschiedenste Facetten des Alltagslebens in und um Heilbronn. Im Museum im Deutschhof geben wechselnde Themenausstellungen wie etwa Ganz schön vermessen! Einblick in die Bandbreite der Bestände.